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RNA pulldown探針制備先確定目標(biāo)序列,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康拇_定合適的RNA序列,可以是目標(biāo)轉(zhuǎn)錄本的全部序列或部分序列,對(duì)照組通常采用反義序列,也可以是無(wú)關(guān)序列.如果目標(biāo)序列小于100bp,建議直接合成帶標(biāo)記的RNA,如果大于100bp,可按照輝駿生物提供的步驟體外轉(zhuǎn)錄獲得.為解決RNA探針標(biāo)記的難題,輝駿生物研發(fā)了一種新的標(biāo)記方法,利用一段只有16nt的RNA標(biāo)簽“F2”來(lái)標(biāo)記RNA,100%標(biāo)記,操作簡(jiǎn)單,成本低
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RNA pulldown用于檢測(cè)RNA-蛋白質(zhì)、或RNA-RNA之間相互作用的技術(shù),其基本原理是:利用帶標(biāo)簽的目標(biāo)RNA探針與待測(cè)蛋白質(zhì)或RNA進(jìn)行體外或體內(nèi)結(jié)合,通過(guò)親和作用將復(fù)合物分離出來(lái),之后采用Western Blot、質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)結(jié)合蛋白或采用qPCR、測(cè)序技術(shù)檢測(cè)結(jié)合RNA。輝駿生物研發(fā)了一種新的標(biāo)記方法,利用一段只有16nt的RNA標(biāo)簽“F2”來(lái)標(biāo)記RNA,再采用與F2具有強(qiáng)大親和力的配體磁珠捕獲互作復(fù)合體。這種標(biāo)記方法可用于標(biāo)記各種類型的RNA(lnRNA、mRNA、circRNA、pre-miRNA或pri-miRNA),操作簡(jiǎn)單、成本低。
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難道沒有完全無(wú)污染的抗體beads嗎?當(dāng)然有!結(jié)合多年的互作實(shí)驗(yàn)和質(zhì)譜經(jīng)驗(yàn),輝駿生物開發(fā)了專門解決輕重鏈污染問(wèn)題的ChainFree?標(biāo)簽抗體磁珠,涵蓋了目前主流的多種標(biāo)簽,比如Flag、HA、Myc、V5、GFP、mCherry。該磁珠上偶聯(lián)了經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選、優(yōu)化并重組表達(dá)的無(wú)輕、重鏈的標(biāo)簽抗體,完全解決了抗體污染問(wèn)題
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輝駿生物可提供rip、rip seq、rip qpcrS實(shí)驗(yàn),價(jià)格低 周期短,可對(duì)圍繞RNA結(jié)合蛋白開展的整體課題提供全方位方案建議.RIP/RIP-seq或RNA免疫沉淀/RNA免疫沉淀測(cè)序是一種高通量實(shí)驗(yàn)技術(shù),用于研究RNA和RNA結(jié)合蛋白之間的相互作用。它允許識(shí)別細(xì)胞或組織內(nèi)的特定RNA結(jié)合蛋白。
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蛋白測(cè)序主要是依靠化學(xué)或酶消化的方法來(lái)分離多肽并檢測(cè)氨基酸殘基的數(shù)量和組成,輝駿生物可對(duì)多種蛋白樣品提供蛋白質(zhì)測(cè)序,蛋白從頭測(cè)序等服務(wù),輝駿基于高精度、高分辨率質(zhì)譜設(shè)備,結(jié)合自主研發(fā)的測(cè)序技術(shù)平臺(tái),能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白氨基酸序列的精準(zhǔn)解讀.該技術(shù)可以用于解析任何純蛋白樣本,比如工具酶、突變蛋白、單克隆抗體等
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影響因子:4.7 期刊 :Frontiers in Oncology 合作技術(shù):RNA pull down MS、RNA免疫沉淀(RIP)、LC-MS/MS質(zhì)譜檢測(cè)
日前,中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院腫瘤科在知名期刊《Frontiers in Oncology》發(fā)表了高分文章,輝駿生物為該合作客戶提供RNA pull down MS、RNA免疫沉淀(RIP)、LC-MS/MS質(zhì)譜檢測(cè)等技術(shù)支持.10年實(shí)驗(yàn)服務(wù)外包經(jīng)驗(yàn),精通RNA pull-down MS,RNA pull-down Wb實(shí)驗(yàn)流程,協(xié)助客戶順利發(fā)文,RNA Pull Down實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定
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蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析是指在蛋白質(zhì)研究和表征中使用質(zhì)譜分析,包括蛋白質(zhì)的定量、分析、相互作用圖譜以及翻譯后修飾的鑒定。 蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析也可稱為基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)。 基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)由三種方法組成:自上而下、中下和自下而上的蛋白質(zhì)組學(xué)。
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輝駿生物提供抗體測(cè)序技術(shù)服務(wù),抗體從頭測(cè)序服務(wù),單克隆抗體從頭測(cè)序服務(wù),蛋白質(zhì)測(cè)序,抗體解析,抗體表達(dá)等多類抗體實(shí)驗(yàn)外包基于高精度、高分辨率質(zhì)譜設(shè)備,結(jié)合自主研發(fā)的測(cè)序技術(shù)平臺(tái),實(shí)現(xiàn)對(duì)抗體氨基酸序列的精準(zhǔn)解讀。同時(shí),我們有自建的高通量表達(dá)驗(yàn)證平臺(tái),能夠?qū)σ褱y(cè)得的抗體序列進(jìn)行高通量表達(dá)驗(yàn)證,從而保證交付抗體的活性。蛋白質(zhì)測(cè)序最有用的應(yīng)用之一是確定抗體序列。有爭(zhēng)議的是,蛋白質(zhì)測(cè)序是目前可用于闡明抗體編碼的最合適的技術(shù)。特別是重新蛋白質(zhì)測(cè)序是抗體測(cè)序的完美應(yīng)用,因?yàn)樗苊饬嘶谕葱缘臄?shù)據(jù)庫(kù)搜索中的隨機(jī)或偏倚引入。
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抗體基因座包含各種基因片段,這些基因片段在發(fā)育中的B細(xì)胞中重新排列以產(chǎn)生高度可變的抗體庫(kù)。輕鏈可變區(qū)(LC)由兩個(gè)基因片段組裝而成,一個(gè)長(zhǎng)可變(V)片段和一個(gè)短連接(J)片段。重鏈(HC)可變區(qū)由V區(qū)段、J區(qū)段和多樣性(D)區(qū)段組裝而成。
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BLAST是生命科學(xué)研究中常用的一套在蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)或核酸數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行序列相似性比對(duì)的一套分析工具。英文全稱是Basic?Local?Alignment?Search?Tool。NCBI作為生命科學(xué)研究領(lǐng)域使用最為廣泛的數(shù)據(jù)庫(kù)之一,深受廣大科研工作者青睞。輝駿生物給大家簡(jiǎn)單介紹一下NCBI上的blast比對(duì)。
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抗體或免疫球蛋白(Ig)保持共同組成的四級(jí)結(jié)構(gòu)兩個(gè)相同的重鏈(高碳鋼)和兩個(gè)相同的輕鏈(LCs)。 結(jié)構(gòu)heterotetrameric與二硫橋連接高碳鋼和LCs在一起形成規(guī)范化免疫球蛋白“Y”的形狀。變量域(V)的重型和輕型鏈(VH和VL分別產(chǎn)生抗原特異性通過(guò)高度可變的氨基酸序列。 V域與抗原相互作用時(shí),恒域(C)在重型和輕型鏈相互作用效應(yīng)和分子的蛋白質(zhì)。 高碳鋼有三個(gè)常數(shù)區(qū)域,與一個(gè)在LCs,屈指可數(shù)的n端來(lái)糖基(CH1,CH2,CH3)
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SILAC實(shí)驗(yàn)技術(shù)于2002年首次引入,作為南丹麥大學(xué)實(shí)驗(yàn)生物信息學(xué)中心 (CEBI) 的一種代謝標(biāo)記技術(shù)。在活細(xì)胞的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中使用了穩(wěn)定的同位素標(biāo)記的氨基酸,隨后可以對(duì)不同實(shí)驗(yàn)條件下的細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行廣泛比較。輝駿生物SILAC定量蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)擁有10多年豐富經(jīng)驗(yàn);公司自有蛋白質(zhì)組學(xué)平臺(tái),silac蛋白質(zhì)譜分析外包代作價(jià)格低,已幫助眾多科研者發(fā)表高分文獻(xiàn)。