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實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介買(mǎi)此服務(wù)買(mǎi)試劑盒

RNA pull down * 實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介


RNA pull down是體外條件下尋找目標(biāo)RNA的結(jié)合蛋白的方法。先將體外轉(zhuǎn)錄的RNA結(jié)合到Beads上,再將RNA-Beads和細(xì)胞裂解液孵育,這樣與目標(biāo)RNA結(jié)合的蛋白便會(huì)一起吸附在Beads上。洗滌掉不結(jié)合的蛋白后,用洗脫液將RNA-protein復(fù)合物從Beads洗脫下來(lái),之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)特定的結(jié)合蛋白,還可以采用質(zhì)譜方法鑒定與目標(biāo)RNA結(jié)合的未知蛋白。



輝駿生物10年科研服務(wù)經(jīng)驗(yàn),專(zhuān)業(yè)提供分子互作實(shí)驗(yàn)服務(wù),包括蛋白與蛋白、蛋白與DNA、蛋白與RNA、RNA與RNA的相互作用技術(shù),經(jīng)驗(yàn)豐富,實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

我公司自有分子、細(xì)胞和質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)平臺(tái),能執(zhí)行最優(yōu)的實(shí)驗(yàn)路線,對(duì)微量互作蛋白的質(zhì)譜鑒定有充足把控力,對(duì)后續(xù)功能分析有獨(dú)到見(jiàn)解。

我們不僅會(huì)提供專(zhuān)業(yè)的售前方案建議、而且售后技術(shù)支持將一直保持到文章發(fā)表,確保您安心進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)及投稿。

目前,客戶已在Nature子刊、Oncogene、Cell Research等高水平期刊成功發(fā)表大量高分文章(點(diǎn)擊查看客戶文獻(xiàn))



RNA pull down * 實(shí)驗(yàn)流程


RNA pull down,rna pull-down實(shí)驗(yàn)原理和步驟



RNA pull down * 應(yīng)用背景


RNA結(jié)合蛋白(RNA binding protein,RBP)是一類(lèi)功能強(qiáng)大而廣泛的調(diào)節(jié)因子,約占細(xì)胞編碼的所有蛋白的5%~10%。目前除了少數(shù)RNA以核酶形式單獨(dú)發(fā)揮功能,大部分RNA通過(guò)與蛋白結(jié)合形成RNA-蛋白復(fù)合物來(lái)發(fā)揮作用。  


一方面,RBP參與RNA合成、可變剪接、修飾、轉(zhuǎn)運(yùn)、翻譯及胞內(nèi)定位等多個(gè)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控過(guò)程,調(diào)控mRNA穩(wěn)定性、lncRNA活性、miRNA沉默復(fù)合體形成等生物學(xué)過(guò)程;另一方面,RNA也會(huì)調(diào)節(jié)這些蛋白質(zhì)的活性、定位或與其他蛋白質(zhì)相互作用,從而影響RBP介導(dǎo)的各種細(xì)胞事件。RNA與蛋白質(zhì)的相互作用對(duì)于維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)是非常重要的,干擾這種相互作用將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞功能失調(diào)和相關(guān)疾病的發(fā)生。  


目前研究RNA-蛋白質(zhì)相互作用的方法分為兩大類(lèi):一是以感興趣的RNA為中心,尋找與該RNA結(jié)合的蛋白質(zhì);二是以感興趣的蛋白質(zhì)為中心,尋找與該蛋白質(zhì)結(jié)合的RNA。RNA pull down屬于前者,通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄的方式將感興趣的RNA帶上標(biāo)簽,通過(guò)該標(biāo)簽使RNA結(jié)合到樹(shù)脂支持物上,再加入樣本蛋白質(zhì)與RNA結(jié)合,洗滌、洗脫得到與目標(biāo)RNA結(jié)合的蛋白質(zhì)。

技術(shù)支持聯(lián)系
18927549347、13430303037



RNA pull down * 輝駿服務(wù)內(nèi)容


服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)內(nèi)容結(jié)果交付實(shí)驗(yàn)周期客戶提價(jià)格

RNA pull down WB

(驗(yàn)證型)

制備RNA正義鏈和反義鏈探針探針電泳圖4-5周

實(shí)驗(yàn)樣本

目標(biāo)基因質(zhì)粒模板

待測(cè)蛋白抗體

實(shí)驗(yàn)信息表


點(diǎn)擊詢(xún)價(jià)
Western blot檢測(cè)樣本中的待測(cè)蛋白Western blot檢測(cè)圖

RNA pull down捕獲目標(biāo)RNA及其結(jié)合蛋白

RNA pull down實(shí)驗(yàn)報(bào)告

Western blot檢測(cè)

RNA pull down MS

(篩選型)

制備RNA正義鏈和反義鏈探針探針電泳圖6-7周

實(shí)驗(yàn)樣本

目標(biāo)基因質(zhì)粒模板

實(shí)驗(yàn)信息表



點(diǎn)擊詢(xún)價(jià)


RNA pull down捕獲目標(biāo)RNA及其結(jié)合蛋白

SDS-PAGE銀染檢測(cè)圖

RNA pull down實(shí)驗(yàn)報(bào)告

LC-MS/MS檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析

質(zhì)譜檢索結(jié)果及報(bào)告

互作蛋白篩選表格

生信分析結(jié)果和報(bào)告



RNA pull down * 樣本要求



樣本類(lèi)型
RNA pull down WB建議送樣量RNA pull down MS建議送樣量
動(dòng)物細(xì)胞
3*10e7個(gè)細(xì)胞/組(約3個(gè)10cm皿)5*10e7個(gè)細(xì)胞/組(約5個(gè)10cm皿)
動(dòng)物組織1g/組2g/組
植物葉片2g/組4g/組
植物根或果實(shí)4g/組8g/組
菌體50ul菌體沉淀/組100ul菌體沉淀/組

▲注意:以上均為每組樣本的送樣量,如果實(shí)驗(yàn)和對(duì)照組用的樣本一致,此樣本量*2。詳細(xì)送樣指南可聯(lián)系輝駿生物索取。

保存及運(yùn)輸:-80℃保存,干冰取樣/運(yùn)輸,至少在送樣前2天通知我司。



RNA pull down * 結(jié)果示例


RNA pull down檢測(cè)圖.jpg

左:RNA pull down WB檢測(cè)圖(陽(yáng)性);    右:RNA pull down MS產(chǎn)物銀染圖


RNA pull down MS質(zhì)譜結(jié)果.png

RNA pull down MS質(zhì)譜檢索表格(部分展示)


RNA pull down生信分析結(jié)果.jpg

正義鏈組獨(dú)有蛋白(潛在結(jié)合蛋白)的生物信息學(xué)分析結(jié)果(部分展示)


技術(shù)支持聯(lián)系
18927549347、13430303037



RNA pull-down 服務(wù)案例—客戶文章解析


The lncRNA LAMP5-AS1 drives leukemia cell stemness by directly modulating DOT1L methyltransferase activity in MLL leukemia. 

Journal of Hematology & Oncology. 2020. (中科院1區(qū),IF=23.168)


lncRNA LAMP5-AS1通過(guò)調(diào)控DOT1L甲基轉(zhuǎn)移酶活性促進(jìn)MLL白血病發(fā)展


研究概述

大量的臨床樣本檢測(cè)發(fā)現(xiàn),一個(gè)長(zhǎng)鏈非編碼RNA(LncRNA)“LAMP5-AS1”在混合系白血病(MLL)中高表達(dá),因此研究者們繼續(xù)探索了它在MLL中的的作用機(jī)制。通過(guò)RNA pull down和RIP-qPCR技術(shù),他們發(fā)現(xiàn)了LAMP5-AS1的潛在結(jié)合蛋白—DOT1L(一種H3K79甲基轉(zhuǎn)移酶),并通過(guò)ChIP-seq和ChIP-qPCR實(shí)驗(yàn)證明LAMP5-AS1能夠影響MLL融合蛋白核心靶基因的H3K79me2/3水平。本研究確定了lncRNA LAMP5-AS1在MLL白血病細(xì)胞的自我更新和分化阻滯中起重要的作用,對(duì)維持DOT1L酶的高活性有重要意義,可能成為治療MLL白血病的一個(gè)有價(jià)值的靶點(diǎn)。


研究路線

細(xì)胞和小鼠實(shí)驗(yàn)確定高表達(dá)的LAMP5-AS1促進(jìn)MLL白血病進(jìn)展
RNA pull-down結(jié)合質(zhì)譜鑒定技術(shù)首次發(fā)現(xiàn)了LAMP5-AS1的潛在結(jié)合蛋白—DOT1L(一種H3K79甲基轉(zhuǎn)移酶)
RIP qPCR實(shí)驗(yàn)確定了LAMP5-AS1與DOT1L結(jié)合
截短型 RNA pull down實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步明確了與LAMP5-AS1結(jié)合的DOT1L結(jié)構(gòu)域
體外酶活實(shí)驗(yàn)表明LAMP5-AS1與DOT1L的結(jié)合促進(jìn)了DOT1L的甲基轉(zhuǎn)移酶活性
ChIP實(shí)驗(yàn)表明LAMP5-AS1影響MLL融合蛋白核心靶基因的H3K79me2/3水平
臨床分析LAMP5-AS可作為MLL白血病不良預(yù)后的預(yù)測(cè)因子




RNA pull-down * 客戶文章


1. Bao. X.C. et al: The p53-induced lincRNA-p21 derails somatic cell reprogramming by sustaining H3K9me3 and CpG methylation at pluripotency gene promoters. Cell Research, 2015. 中科院1區(qū),IF=46.297.

【研究?jī)?nèi)容】:作者通過(guò)RNA pull-down、RIP-qPCR、CoIP等技術(shù),證實(shí)了lincRNA-p21與HNRNPK結(jié)合,并和甲基化酶SETDB1、DNMT1形成復(fù)合物。該復(fù)合物甲基化了多能性基因的啟動(dòng)子序列及相應(yīng)組蛋白,并改變了它們的表達(dá)量,從而進(jìn)一步影響體細(xì)胞重編程過(guò)程。

使用相關(guān)技術(shù):RNA pull-down



2. Bao X.C. et al: Capturing the interactome of newly transcribed RNA. Nature Methods, 2018. 中科院1區(qū),IF=47.99.
【研究?jī)?nèi)容】:輝駿生物為作者單位之一,和客戶共同開(kāi)發(fā)了一種全新的RNA pull down,并用質(zhì)譜鑒定新生RNA結(jié)合蛋白的方法。該方法主要是用EU標(biāo)記新生RNA,再用點(diǎn)擊反應(yīng)-生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)做RNA-pull down,然后質(zhì)譜鑒定分離的新生RNA互作蛋白。用該rna pulldown方法,首次鑒定到重要周期蛋白CCK1為RNA結(jié)合蛋白。RIP-qPCR、CLIP-Seq等實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了CCK1為RBP蛋白,并發(fā)揮著重要的細(xì)胞。
使用相關(guān)技術(shù):RNA pull down WB、RNA pull-down 技術(shù)服務(wù)


3. He S.W. et al: AR-induced long non-coding RNA LINC01503 facilitates proliferation and metastasis via the SFPQ-FOSL1 axis in nasopharyngeal carcinoma. Oncogene, 2020. 中科院1區(qū),IF=8.756.
【研究?jī)?nèi)容】:lncRNA LINC01503在鼻咽癌中高表達(dá),并且促進(jìn)了腫瘤的不良預(yù)后。作者在此探討了LINC01503的作用機(jī)理,先用RNA pull down和質(zhì)譜鑒定,發(fā)現(xiàn)SFPQ蛋白可能和LINC01503結(jié)合。RIP-qPCR實(shí)驗(yàn)確證了鼻炎癌中LINC01503募集了SFPQ基因。基于SFPQ-FOSL1軸在癌癥研究中的重要地位,作者后續(xù)的工作思路之一也是關(guān)注該信號(hào)軸,并設(shè)計(jì)了CHIP-qPCR等實(shí)驗(yàn)做出證明。RNA pull down配合質(zhì)譜鑒定,為此文研究提供了關(guān)鍵性的研究源頭。
使用相關(guān)技術(shù)RNA pulldown實(shí)驗(yàn)、rna-pull down 打質(zhì)譜




RNA pull-down * 輝駿服務(wù)優(yōu)勢(shì)

1

十年服務(wù)經(jīng)驗(yàn),客戶成果發(fā)表在Nature Methods,Oncogene,Cell Research等高水平期刊上。

2

對(duì)圍繞RNA結(jié)合蛋白開(kāi)展的整體課題提供全方位指導(dǎo),包括上下游實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)合蛋白的多方法驗(yàn)證等

3

自有蛋白質(zhì)組學(xué)平臺(tái),對(duì)RNA pull down產(chǎn)物這類(lèi)微量蛋白的質(zhì)譜鑒定有十足的把控能力,對(duì)后續(xù)的生物信息分析有獨(dú)到的見(jiàn)解。

4

售后技術(shù)支持將一直保持到客戶發(fā)表文章,確??蛻舭残倪M(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)及投稿。



F2 RNA pulldown試劑盒/RNA pulldown試劑盒-強(qiáng)親和力/蛋白調(diào)取好-輝駿生物專(zhuān)業(yè)試劑盒供應(yīng)商



輝駿實(shí)力

輝駿DNA-pull down實(shí)驗(yàn)技術(shù)外包服務(wù)


輝駿生物RNA-pull down實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)分以下兩種:


1. RNA pull down WB,用于檢測(cè)目標(biāo)RNA與某樣本中的待測(cè)蛋白是否存在相互作用;

2. RNA pull down MS,用于篩選目標(biāo)RNA與某樣本中的哪些蛋白具有相互作用。


RNA Pull down檢測(cè)服務(wù)
服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)內(nèi)容結(jié)果交付實(shí)驗(yàn)周期客戶提價(jià)格
RNA pull down WB制備RNA正義鏈和反義鏈探針探針電泳圖5-6周

1、實(shí)驗(yàn)樣本

2、含有目標(biāo)基因序列的質(zhì)粒模板及測(cè)序文件

3、待測(cè)蛋白抗體

4、實(shí)驗(yàn)信息表(樣本信息、抗體信息、目標(biāo)RNA和待測(cè)蛋白序列)



點(diǎn)擊詢(xún)價(jià)
Western blot檢測(cè)待測(cè)樣本中的待測(cè)蛋白Western blot檢測(cè)圖

RNA pull down捕獲目標(biāo)RNA及其結(jié)合蛋白

(2組:正義鏈孵育組、反義鏈孵育組)
RNA pull down實(shí)驗(yàn)報(bào)告
Western blot檢測(cè)RNA Pull down產(chǎn)物中的待測(cè)蛋白Western blot檢測(cè)圖
RNA pull down MS制備RNA正義鏈和反義鏈探針探針電泳圖8-9周

1、實(shí)驗(yàn)樣本

2、含有目標(biāo)基因序列的質(zhì)粒模板及測(cè)序文件

3、實(shí)驗(yàn)信息表(樣本信息、目標(biāo)RNA序列)




點(diǎn)擊詢(xún)價(jià)


RNA pull down捕獲目標(biāo)RNA及其結(jié)合蛋白

(2組:正義鏈孵育組、反義鏈孵育組)
pull down實(shí)驗(yàn)報(bào)告
SDS-PAGE評(píng)估RNA pull down產(chǎn)物中的蛋白含量和數(shù)量SDS-PAGE銀染檢測(cè)圖
LC-MS/MS定性檢測(cè)pull down產(chǎn)物的蛋白、篩選實(shí)驗(yàn)組獨(dú)有蛋白(潛在互作蛋白)質(zhì)譜檢索表格、互作蛋白篩選表格、檢測(cè)報(bào)告
針對(duì)互作蛋白做生物信息學(xué)分析(GO、KEGG pathway、String)生物信息學(xué)分析結(jié)果和報(bào)告1周


添加技術(shù)員微信了解服務(wù)詳情
18927549347、13430303037





RNA pull-down服務(wù)優(yōu)勢(shì)*輝駿生物


1

十年服務(wù)經(jīng)驗(yàn),客戶成果發(fā)表在Nature Methods,Oncogene,Cell Research等高水平期刊上。

2

對(duì)圍繞RNA結(jié)合蛋白開(kāi)展的整體課題提供全方位指導(dǎo),包括上下游實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)合蛋白的多方法驗(yàn)證等。

3

自有蛋白質(zhì)組學(xué)平臺(tái),對(duì)RNA pull down產(chǎn)物這類(lèi)微量蛋白的質(zhì)譜鑒定有十足的把控能力,對(duì)后續(xù)的生物信息分析有獨(dú)到的見(jiàn)解。

4

售后技術(shù)支持將一直保持到客戶發(fā)表文章,確??蛻舭残倪M(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)及投稿。




RNA pulldown實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)樣本要求


1. 送樣量要求

樣本類(lèi)型
RNA pull down WB建議送樣量RNA pull down MS建議送樣量
動(dòng)物細(xì)胞
3*10e7個(gè)細(xì)胞/組(約3個(gè)10cm皿)5*10e7個(gè)細(xì)胞/組(約5個(gè)10cm皿)
動(dòng)物組織1g/組2g/組
植物葉片2g/組4g/組
植物根或果實(shí)4g/組8g/組
菌體50ul菌體沉淀/組100ul菌體沉淀/組


▲注意:這里列出的均為每組樣本的送樣量,如果實(shí)驗(yàn)和對(duì)照組用的樣本一致,此樣本量*2。詳細(xì)送樣指南可聯(lián)系輝駿生物客服或銷(xiāo)售索取。

 

2. 樣本保存和運(yùn)輸要求:

(1)樣本用PBS清洗干凈后,離心去掉液體,先放入液氮中速凍,再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱中保存;

(2)樣本一定要做好標(biāo)記,應(yīng)用油性防凍記號(hào)筆或標(biāo)簽紙?jiān)诠苌献⒚鳂颖久Q(chēng)或編號(hào);

(3)樣本較多或需要分批做,要將樣本分裝;

(4)干冰取樣/運(yùn)輸;需要至少在送樣前一天通知我方。





RNA pull down實(shí)驗(yàn)結(jié)果示例


RNA pull down實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)結(jié)果

RNA pulldown WB:Western blot檢測(cè)圖(陽(yáng)性)


RNA pull down實(shí)驗(yàn)結(jié)果條帶怎么看

RNA pull-down MS:SDS-PAGE銀染檢測(cè)圖


RNA pull-down實(shí)驗(yàn)原理和步驟及結(jié)果分析

RNA pull down-MS:質(zhì)譜檢索表格(部分展示)





RNA pull-down實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)客戶文章


1. Bao. X.C. et al: The p53-induced lincRNA-p21 derails somatic cell reprogramming by sustaining H3K9me3 and CpG methylation at pluripotency gene promoters.Cell Research.2015, IF=13.9.

【研究?jī)?nèi)容】:作者通過(guò)RNA pull-down、RIP-qPCR、CoIP等技術(shù),證實(shí)了lincRNA-p21與HNRNPK結(jié)合,并和甲基化酶SETDB1、DNMT1形成復(fù)合物。該復(fù)合物甲基化了多能性基因的啟動(dòng)子序列及相應(yīng)組蛋白,并改變了它們的表達(dá)量,從而進(jìn)一步影響體細(xì)胞重編程過(guò)程。

使用相關(guān)技術(shù):rna pull-down、RNA-蛋白相互作用


2. Bao X.C. et al: Capturing the interactome of newly transcribed RNA. Nature Methods,15(3): 213–220. 2018,IF=28.467.
【研究?jī)?nèi)容】:輝駿生物為作者單位之一,和客戶共同開(kāi)發(fā)了一種全新的RNA pull down,并用質(zhì)譜鑒定新生RNA結(jié)合蛋白的方法。該方法主要是用EU標(biāo)記新生RNA,再用點(diǎn)擊反應(yīng)-生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)做RNA-pull down,然后質(zhì)譜鑒定分離的新生RNA互作蛋白。用該rna pulldown方法,首次鑒定到重要周期蛋白CCK1為RNA結(jié)合蛋白。RIP-qPCR、CLIP-Seq等實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了CCK1為RBP蛋白,并發(fā)揮著重要的細(xì)胞。
使用相關(guān)技術(shù):RNA pull down WB、RNA pull-down 技術(shù)服務(wù)


3. Wang W.T. et al: The lncRNA LAMP5-AS1 drives leukemia cell stemness by directly modulating DOT1L methyltransferase activity in MLL leukemia. Journal of Hematology & Oncology.2020,IF=11.059.
【研究?jī)?nèi)容】:研究顯示高表達(dá)的LncRNA LAMP5-AS1能降低MLL白血病患者5年生存率。利用RNA pull down配合蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定技術(shù),作者首次發(fā)現(xiàn)LAMP5-AS1和DOT1L蛋白可能形成復(fù)合物。DOT1L是表觀遺傳中非常重要的甲基化酶。作者通過(guò)RIP-qPCR進(jìn)一步確定了MLL細(xì)胞存在該復(fù)合物,并通過(guò)截短型RNA pull down實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定了DOT1L的結(jié)合序列。后續(xù)的ChIP-qPCR等實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該復(fù)合物能有效影響DOT1L對(duì)組蛋白H3K79的甲基化水平,從而影響細(xì)胞的增殖分化。
使用相關(guān)技術(shù):rna pulldown實(shí)驗(yàn)、rna pull down ms、rna pulldown探針


4. He S.W. et al: AR-induced long non-coding RNA LINC01503 facilitates proliferation and metastasis via the SFPQ-FOSL1 axis in nasopharyngeal carcinoma. Oncogene. 2020,IF=7.971.
【研究?jī)?nèi)容】:lncRNA LINC01503在鼻咽癌中高表達(dá),并且促進(jìn)了腫瘤的不良預(yù)后。作者在此探討了LINC01503的作用機(jī)理,先用RNA pull down和質(zhì)譜鑒定,發(fā)現(xiàn)SFPQ蛋白可能和LINC01503結(jié)合。RIP-qPCR實(shí)驗(yàn)確證了鼻炎癌中LINC01503募集了SFPQ基因?;赟FPQ-FOSL1軸在癌癥研究中的重要地位,作者后續(xù)的工作思路之一也是關(guān)注該信號(hào)軸,并設(shè)計(jì)了CHIP-qPCR等實(shí)驗(yàn)做出證明。RNA pull down配合質(zhì)譜鑒定,為此文研究提供了關(guān)鍵性的研究源頭。
使用相關(guān)技術(shù)RNA pulldown實(shí)驗(yàn)、rna-pull down 打質(zhì)譜


4899+客戶已添加微信獲取實(shí)驗(yàn)優(yōu)惠!


 名稱(chēng) 貨號(hào) 規(guī)格
 貨
價(jià)格
 F2 RNA pull down試劑盒 FI8701(動(dòng)物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨



點(diǎn)擊詢(xún)價(jià)
 FI8711(植物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨
 FI8721(微生物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨
 生物素RNA pull down試劑盒
 FI8702(動(dòng)物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨
 FI8712(植物)
 12次/24次/40次 現(xiàn)貨
 FI8722(微生物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨


添加微信領(lǐng)取試劑盒說(shuō)明書(shū)
18927549347、13430303037




F2-RNA pull down試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介


輝駿生物自主研發(fā)的 F2-RNA pull-down 試劑盒(專(zhuān)利號(hào):ZL202111160837.9),利用一段只有16nt的RNA標(biāo)簽“F2”與目標(biāo)RNA連接,通過(guò)固定在磁珠上的特異性配體與F2標(biāo)簽的強(qiáng)親和力,高效調(diào)取目標(biāo)RNA,同時(shí)捕獲與之結(jié)合的蛋白;之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)特定蛋白,也可以采用質(zhì)譜(LC-MS/MS)技術(shù)鑒定未知蛋白。


輝駿生物FII-RNA pull down試劑盒和方法及其應(yīng)用專(zhuān)利證書(shū),F(xiàn)2-RNA pull down試劑盒-強(qiáng)親和力/操作簡(jiǎn)便/周期短/價(jià)格低

輝駿生物FII-RNA pull down試劑盒和方法及其應(yīng)用專(zhuān)利證書(shū)




F2-RNA pulldown試劑盒產(chǎn)品應(yīng)用


RNA結(jié)合蛋白(RBPs)是一類(lèi)功能強(qiáng)大而廣泛的調(diào)節(jié)因子,約占細(xì)胞編碼的所有蛋白的5%-10%。除了少數(shù)RNA以核酶形式單獨(dú)發(fā)揮功能,大部分RNA通過(guò)與蛋白結(jié)合形成RNA-蛋白復(fù)合物來(lái)發(fā)揮作用。一方面,RBP參與RNA調(diào)控,另一方面,RNA也會(huì)調(diào)控RBPs。以下列舉了可應(yīng)用F2-RNA pull down試劑盒幾個(gè)研究方向:

1. RNA活性、轉(zhuǎn)運(yùn)、定位調(diào)控;

2. RNA穩(wěn)定性、翻譯和降解;

3. RNA合成、可變剪切;

4. RNA修飾;

5. RBPs的活性、定位或與其他蛋白質(zhì)相互作用。




F2-RNA pulldown試劑盒組分


試劑名稱(chēng)
體積(12 Tests)體積(24 Tests)保存條件
磁珠500 μL1 mL4 ℃
裂解緩沖液7 mL14 mL4 ℃
NT2緩沖液32 mL64 mL4 ℃
RNA結(jié)構(gòu)緩沖液650 μL1.3 mL4 ℃
漂洗液32 mL64 mL4 ℃
洗脫緩沖液650 μL1.3 mL-20 ℃
蛋白酶抑制劑230 μL460 μL-20 ℃
RNase抑制劑65 μL130μL-20 ℃
F2配體250 μL500 μL-20 ℃




F2-RNA pull down試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1、F2標(biāo)簽是一段RNA序列,可以連接和標(biāo)記各種類(lèi)型的RNA;

2、F2標(biāo)簽很短,只有16nt,幾乎不影響目標(biāo)RNA的結(jié)構(gòu)或功能;

3、可以用于體內(nèi)或體外標(biāo)記目標(biāo)RNA;

4、F2標(biāo)簽與其特異性配體具有很強(qiáng)親和力,能夠高效調(diào)取F2-RNA及其結(jié)合蛋白。

F2-RNA pull-down試劑盒-強(qiáng)親和力-蛋白結(jié)合性好.png




生物素RNA Pull down試劑盒簡(jiǎn)介


RNA pull-down是檢測(cè)RNA及其結(jié)合蛋白(RNA binding protein,RBP)之間相互作用的主要實(shí)驗(yàn)手段之一。生物素-RNA pull down試劑盒利用體外轉(zhuǎn)錄的生物素標(biāo)記RNA來(lái)模擬天然RNA分子,作為探針,與樣本裂解液孵育,探針與裂解液中的蛋白形成RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物;通過(guò)鏈霉親和素磁珠與生物素之間的強(qiáng)親和力,特異性捕獲生物素標(biāo)記的RNA,從而實(shí)現(xiàn)RNA結(jié)合蛋白(RBPs)的捕獲富集;之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)特定蛋白,也可以采用質(zhì)譜(LC-MS/MS)技術(shù)鑒定未知蛋白。




生物素RNA pulldown試劑盒組分


試劑名稱(chēng)
體積(12 Tests)體積(24 Tests)保存條件
鏈霉親和素磁珠500 μL1 mL4 ℃
裂解緩沖液7 mL14 mL4 ℃
NT2緩沖液16 mL32 mL4 ℃
RNA結(jié)構(gòu)緩沖液650 μL1.3 mL4 ℃
漂洗液32 mL64 mL4 ℃
洗脫緩沖液650 μL1.3 mL-20 ℃
蛋白酶抑制劑230 μL460 μL-20 ℃
RNase抑制劑65 μL130μL-20 ℃


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