熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)實驗原理

實時熒光定量PCR（qPCR)是對基因進(jìn)行相對或絕對定量的實驗技術(shù)，分為探針法和染料法兩種方法。

染料法的原理是：在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實時的監(jiān)測。在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時期，模板的CT值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系，所以成為定量的依據(jù)。

我公司可提供基于SYBR Green染料法的熒光定量PCR服務(wù)。

熒光定量PCR服務(wù)流程

? 引物設(shè)計與合成

? 基因模板制備：RNA提取和反轉(zhuǎn)錄，或DNA提取；

? qPCR預(yù)實驗：檢測目的基因和內(nèi)參基因的擴(kuò)增情況；

? qPCR正式實驗：每個樣本設(shè)置三復(fù)孔；確定樣本擴(kuò)增產(chǎn)物單一，內(nèi)參基因CT值正常；

? 數(shù)據(jù)分析和出具報告：計算樣本間的目的基因表達(dá)差異，并作柱形圖。

熒光定量PCR服務(wù)信息

添加技術(shù)員微信溝通實驗

18927549347

熒光定量PCR（qPCR）實驗服務(wù)*輝駿優(yōu)勢

1

十年服務(wù)經(jīng)驗，客戶成果發(fā)表在NatureMethods，Oncogene，Cell Research等高水平期刊上。

2

自有分子及細(xì)胞生物實驗平臺，能有效制定并執(zhí)行最優(yōu)的實驗路線。

3

售后技術(shù)支持將一直保持到客戶發(fā)表文章，確?？蛻舭残倪M(jìn)行下游實驗及投稿。

PCR（qPCR）熒光定量結(jié)果示例

實時熒光定量PCR（qPCR）擴(kuò)增曲線圖

實時熒光定量PCR（qPCR）溶解曲線圖

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