產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 價格 |
F2-RNA pull-down試劑盒(動物) | FI8701 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 | |
F2-RNA pull-down試劑盒(植物) | FI8711 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 | |
F2-RNA pull-down試劑盒(微生物) | FI8721 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 |
輝駿生物自主研發(fā)的 F2-RNA pull-down 試劑盒(專利號:ZL202111160837.9),利用一段只有16nt的RNA標簽“F2”與目標RNA連接,通過固定在磁珠上的特異性配體與F2標簽的強親和力,高效調(diào)取目標RNA,同時捕獲與之結(jié)合的蛋白;之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測特定蛋白,也可以采用質(zhì)譜(LC-MS/MS)技術(shù)鑒定未知蛋白。
輝駿生物FII-RNA pull down試劑盒和方法及其應(yīng)用專利證書
RNA結(jié)合蛋白(RBPs)是一類功能強大而廣泛的調(diào)節(jié)因子,約占細胞編碼的所有蛋白的5%-10%。除了少數(shù)RNA以核酶形式單獨發(fā)揮功能,大部分RNA通過與蛋白結(jié)合形成RNA-蛋白復(fù)合物來發(fā)揮作用。一方面,RBP參與RNA調(diào)控,另一方面,RNA也會調(diào)控RBPs。以下列舉了可應(yīng)用F2-RNA pull down試劑盒的幾個研究方向:
1. RNA活性、轉(zhuǎn)運、定位調(diào)控;
2. RNA穩(wěn)定性、翻譯和降解;
3. RNA合成、可變剪切;
4. RNA修飾;
5. RBPs的活性、定位或與其他蛋白質(zhì)相互作用。
試劑名稱 | 體積(12 Tests) | 體積(24 Tests) | 保存條件 |
磁珠 | 500 μL | 1 mL | 4 ℃ |
裂解緩沖液 | 7 mL | 14 mL | 4 ℃ |
NT2緩沖液 | 32 mL | 64 mL | 4 ℃ |
RNA結(jié)構(gòu)緩沖液 | 650 μL | 1.3 mL | 4 ℃ |
漂洗液 | 32 mL | 64 mL | 4 ℃ |
洗脫緩沖液 | 650 μL | 1.3 mL | -20 ℃ |
蛋白酶抑制劑 | 230 μL | 460 μL | -20 ℃ |
RNase抑制劑 | 65 μL | 130μL | -20 ℃ |
F2配體 | 250 μL | 500 μL | -20 ℃ |
1、F2標簽是一段RNA序列,可以連接和標記各種類型的RNA;
2、F2標簽很短,只有16nt,幾乎不影響目標RNA的結(jié)構(gòu)或功能;
3、可以用于體內(nèi)或體外標記目標RNA;
4、F2標簽與其特異性配體具有很強親和力,能夠高效調(diào)取F2-RNA及其結(jié)合蛋白。
RNA pull down試劑盒產(chǎn)品對比表
F2-RNA pull down試劑盒 | 生物素-RNA pull down試劑盒 | |
標記方法 | 通過PCR法連接目標RNA | 體外轉(zhuǎn)錄時將生物素UTP摻入目標RNA |
標記效率 | 100% | 隨RNA長度增加而降低 |
標記類型 | 體內(nèi)和體外標記均可 | 體外標記 |
實驗成本 | 需要額外購買RNA體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 | 需要額外購買RNA體外轉(zhuǎn)錄試劑盒、生物素UTP mix、RNA純化試劑盒 |
實驗難度 | 操作簡單 | 步驟多,對初學(xué)者不友好 |
1. 體外轉(zhuǎn)錄或體內(nèi)表達獲得目標RNA-F2;
2. 利用磁珠上的特異性配體捕獲目標RNA-F2;
3. 與待測蛋白液孵育,調(diào)取目標RNA的結(jié)合蛋白。
左:RNA pull down WB檢測圖(陽性); 右:RNA pull down MS產(chǎn)物銀染圖
RNA pull down MS質(zhì)譜檢索表格(部分展示)
3. Luo N. et al: Up-regulated Lnc BTU promotes the production of duck plague virus DNA polymerase and inhibits the activation of JAK-STAT pathway to facilitate duck plague virus replication. 2024. Poultry Science. 1區(qū), IF=4.4.
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