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抗體的新特性:輕鏈一致性的研究報(bào)告
發(fā)布時(shí)間:2022-10-31 15:13:12作者:輝駿生物-fitgene

在最近發(fā)表在《Nature》雜志上的一項(xiàng)研究中,研究人員調(diào)查了具有相似重鏈的幼稚、未轉(zhuǎn)換、記憶和成漿細(xì)胞表型的不相關(guān)B細(xì)胞對(duì)是否也具有相同的輕鏈。


背景

盡管如此,將抗體按功能分組仍是一個(gè)挑戰(zhàn)。理論上,具有相同功能的抗體應(yīng)該具有相似的表位和互補(bǔ)的表位。然而,雖然在試管內(nèi)特異性抗體的分析抗原結(jié)合相對(duì)來(lái)說(shuō)更簡(jiǎn)單,只有少量的抗體可以分析它們的中和活性。


克隆型是來(lái)自單個(gè)供體的抗體組,其來(lái)源于共同的祖先重組細(xì)胞。在個(gè)體內(nèi)部和個(gè)體之間發(fā)現(xiàn)了具有相同功能的相似克隆型。


涉及流感、寨卡和人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)的研究表明,抗體在其重鏈和輕鏈基因中表現(xiàn)出一定的保真度。然而,輕鏈一致性,即不屬于具有相似重鏈的相同克隆型的不相關(guān)B細(xì)胞中相似輕鏈的出現(xiàn),還沒(méi)有被檢驗(yàn)。


關(guān)于研究

在目前的研究中,研究人員對(duì)160萬(wàn)對(duì)原始、非轉(zhuǎn)換、漿母細(xì)胞和類(lèi)別轉(zhuǎn)換記憶表型的B細(xì)胞進(jìn)行了全長(zhǎng)抗體基因測(cè)序,這些B細(xì)胞是從四個(gè)無(wú)關(guān)個(gè)體捐獻(xiàn)的外周血樣本中獲得的。序列覆蓋了V基因的前導(dǎo)區(qū)和用于確定抗體亞類(lèi)和同種型的部分恒定區(qū)。


根據(jù)從每個(gè)供體推斷的V基因等位基因估計(jì)的連接區(qū)外發(fā)生的體細(xì)胞超突變,將序列分為初始和記憶B細(xì)胞組。不顯示突變的抗體序列被認(rèn)為是原始的,其他的被認(rèn)為是記憶B細(xì)胞序列。使用流式細(xì)胞儀分類(lèi)來(lái)確認(rèn)這些分配。


分別比較具有相似重鏈V基因和抗體重鏈第三互補(bǔ)決定區(qū)(CDRH3)長(zhǎng)度的B細(xì)胞對(duì)的原始和記憶細(xì)胞類(lèi)型,以確定輕鏈基因是否也相似。


假設(shè)抗體復(fù)發(fā)是由常見(jiàn)的重組事件引起的,通過(guò)將抗體序列與V(D)J參考序列進(jìn)行比對(duì)來(lái)分析連接序列。這使得研究人員能夠確定觀察到的復(fù)發(fā)率是否與偶然預(yù)期的復(fù)發(fā)率相當(dāng)。


模擬也用于預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的初始抗體的數(shù)量。還將復(fù)發(fā)抗體與任意抗體進(jìn)行比較,以確定連接區(qū)域的復(fù)雜性。


研究結(jié)果

結(jié)果表明,在V區(qū)具有相同重鏈基因和100% cdr H2氨基酸同一性的不同來(lái)源記憶B細(xì)胞中,輕鏈一致性為82%。相比之下,未經(jīng)功能性選擇且不含體細(xì)胞超突變的幼稚B細(xì)胞,其輕鏈只有10%的一致性。


因此,在記憶B細(xì)胞中,輕鏈相干可能與重鏈相干同時(shí)發(fā)生。這些細(xì)胞由外周和胸腺選擇形成,并產(chǎn)生功能性抗體。


對(duì)冠狀病毒疾病2019(新冠肺炎)、多發(fā)性硬化、川崎病和其他疾病相關(guān)的獨(dú)立數(shù)據(jù)集的分析表明,記憶B細(xì)胞中的輕鏈一致性為93%。然而,本數(shù)據(jù)與其他獨(dú)立的更早和更近的數(shù)據(jù)的成對(duì)比較揭示了70%的輕鏈一致性,因此排除了這些結(jié)果被交叉污染解釋的可能性。


此外,10%的記憶和幼稚B細(xì)胞的隨機(jī)交換導(dǎo)致記憶B細(xì)胞82%的輕鏈一致性和幼稚細(xì)胞17%的一致性,從而排除了可能的細(xì)胞錯(cuò)誤分類(lèi)。


連接區(qū)的比較顯示,與任意抗體相比,記憶和初始B細(xì)胞類(lèi)型的復(fù)發(fā)性抗體具有明顯更少的插入堿基和相對(duì)不復(fù)雜的連接區(qū)。這增加了偶然事件再次發(fā)生的可能性。


與初始抗體相比,具有插入核苷酸的復(fù)發(fā)性抗體繼續(xù)表現(xiàn)出輕鏈一致性。這表明所有功能性抗體,無(wú)論其復(fù)雜性如何,都表現(xiàn)出輕鏈一致性,只是頻率不同。


結(jié)論

總的來(lái)說(shuō),目前的研究報(bào)告說(shuō),輕鏈一致性在記憶B細(xì)胞中普遍存在,而在幼稚細(xì)胞中的復(fù)發(fā)純粹是一個(gè)機(jī)會(huì)的函數(shù)。


輕鏈相干性與選擇和獲得的功能相關(guān)。這一觀察解釋了為什么它在幼稚B細(xì)胞中不太常見(jiàn),而在抗原暴露后經(jīng)歷中樞和外周選擇的記憶B細(xì)胞中更普遍。此外,與任意抗體連接區(qū)相比,初始和記憶B細(xì)胞的復(fù)發(fā)與復(fù)發(fā)抗體中連接復(fù)雜性的降低有關(guān),因此解釋了它們的復(fù)發(fā)率。


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