單克隆抗體 (MAb) 由單個 B 細胞克隆產(chǎn)生,可與單一類型的抗原結(jié)合位點結(jié)合。 MAb 是同質(zhì)抗體,不能與單體蛋白形成晶格,因為它們只能與抗原上的單個表位結(jié)合。 開發(fā)于 1970 年代的 MAb 可以針對任何給定物質(zhì)生產(chǎn),因此,它們可用于檢測和純化任何感興趣的物質(zhì)。 這使得 MAb 成為分子生物學(xué)、生物化學(xué)和醫(yī)學(xué)的強大工具。
MAb 是使用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的。 這種方法提供了無限的均質(zhì)抗體供應(yīng),具有所需的特異性。
雜交瘤技術(shù)是由 Georges K?hler 和 César Milstein 于 1975 年開發(fā)的,他們在 1984 年分享了諾貝爾生理學(xué)/醫(yī)學(xué)獎。他們的方法利用了骨髓瘤細胞不斷分裂和生長并產(chǎn)生抗體的能力。
在這種方法中,來自免疫哺乳動物的 B 淋巴細胞與永生的骨髓瘤細胞融合。 融合產(chǎn)物被克隆形成雜交瘤并無限增殖。 使用 ELISA 分析雜交瘤以選擇可用于在第二只動物中誘導(dǎo)腫瘤的所需均質(zhì)免疫球蛋白混合物。
腫瘤會分泌一種富含抗體的液體,稱為腹水,將其提取并進行色譜分離以分離 MAb。 然后將這些 MAb 純化以去除污染物,然后在實驗室中用于不同目的。 由于雜交瘤是永生的,因此該技術(shù)提供了可再生的 MAb 來源。
MAb 的單一特異性可用于以下領(lǐng)域:
1、研究
● 分子構(gòu)象變化研究
● 磷酸化狀態(tài)分析
● 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究
● 在結(jié)構(gòu)分析中,例如 X 射線晶體學(xué)
● 識別蛋白質(zhì)家族的單個成員
2、藥品
● 在癌癥診斷和治療中
● 用于預(yù)防同種異體移植排斥
● 在腫瘤和造血疾病治療中
● 治療心肌梗塞
● 逆轉(zhuǎn)藥物毒性
因為單克隆抗體分子在藥物研發(fā)、診斷試劑開發(fā)中扮演了關(guān)鍵的角色??贵w分子的一級結(jié)構(gòu),特別是其CDR區(qū)域的氨基酸序列是發(fā)揮其生物學(xué)功能的核心,對其完整序列準確快速的分析具有重要的意義。輝駿生物基于高精度、高分辨率質(zhì)譜設(shè)備,結(jié)合自主研發(fā)的測序技術(shù)平臺,能夠?qū)崿F(xiàn)對抗體氨基酸序列的精準解讀。同時,我們有自建的高通量表達驗證平臺,能夠?qū)σ褱y得的抗體序列進行高通量表達驗證,從而保證交付抗體的活性。
MAb 的主要優(yōu)勢如下:
● MAb 是同質(zhì)且一致的。
● 一旦開發(fā)出合適的雜交瘤,它們就可以可再生地產(chǎn)生。
● 與多克隆抗體相比,MAb 中特定抗體的純度和濃度更高。
● MAb 對鹽濃度和 pH 值的微小變化高度敏感。
● 它們可以很容易地測試交叉反應(yīng)性
MAb 的一些缺點如下:
● MAb 的單一特異性也限制了它們的應(yīng)用
● 抗原表位結(jié)構(gòu)的微小變化會影響 MAb 的功能
● MAb 的產(chǎn)生應(yīng)該對其需要結(jié)合的抗原非常特異。
● 它們不適合用于涉及抗原交聯(lián)的血凝等分析; 輕微的修飾會影響抗體的結(jié)合位點
● 雖然這些限制可以通過匯集多個具有所需特異性的 MAb 來克服,但此類 MAb 的鑒定可能證明是昂貴、費力和耗時的。
多年來,抗體一直是實驗室研究中的非凡工具。 MAb 是在大約 25 年前開發(fā)的,并且已將抗體的范圍擴大到對 離體 多種疾病 科學(xué)家們通過將它們用于免疫療法,越來越多地利用它們的高特異性和選擇性結(jié)合能力。
雜交瘤技術(shù)的出現(xiàn)導(dǎo)致MAb的無限可用性。 使用該技術(shù)生成的大量 MAb 有助于識別和分析抗原來自幾種不同人類黑色素瘤、癌、淋巴瘤和白血病迄今為止可用的文獻報道了超過100 種針對人類癌癥的獨特MAb。
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