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中文標題：ATF1蛋白的Thr184磷酸化促進胃癌轉移和調控MMP2表達

發(fā)表期刊：Journal of Translational Medicine

中科院分區(qū)：2區(qū)

影響因子：8.440

發(fā)表時間：2022年4月

合作單位：廣東醫(yī)科大學

運用技術：免疫共沉淀CO-IP、LC-MS/MS蛋白質譜鑒定（由輝駿生物提供技術支持，點擊查看服務詳情）

● 研究背景

激活轉錄因子1（ATF1）是一種ATF/CREB家族的轉錄因子。ATF1和CREB通過家族內的同源或異二聚化或與其他b-zip轉錄因子結合調控靶基因的轉錄。之前的研究已發(fā)現(xiàn)Thr184是ATF1的一個新磷酸化位點，然而，Thr184磷酸化（p-ATF1-T184）在腫瘤中的作用尚不清楚。本研究探討了p-ATF1-T184在胃癌(GC)轉移和基質金屬肽酶2（MMP2）調控中的作用。

● 研究方法

采用免疫組化方法分析p-ATF1-T184水平及其與臨床病理特征的關系。采用細胞劃痕、Transwell實驗觀察p-ATF1-T184在胃癌侵襲、轉移中的作用。通過qRT-PCR、western blot、明膠酶譜法、染色質免疫沉淀(ChIP)、熒光素酶報告基因實驗和環(huán)己亞胺實驗等研究p-ATF1-T184對MMP2的調控作用。利用腫瘤基因組圖譜(Cancer Genome Atlas, TCGA)數(shù)據(jù)分析ATF1和MMP2在胃癌中的表達及其預后作用。采用免疫共沉淀法(co-IP)結合質譜分析(MS)，以鑒定可能磷酸化ATF1蛋白Thr184位點的上游激酶。

● 研究結果

在126例胃癌患者中發(fā)現(xiàn)高水平的p-ATF1-T184與淋巴結轉移和低生存率顯著相關。P-ATF1-T184促進胃癌細胞的遷移和侵襲。ATF1-T184磷酸化可調節(jié)MMP2 mRNA、蛋白表達及胞外活性。

P-ATF1-T184進一步提高了ATF1的DNA結合能力和轉錄活性，穩(wěn)定了ATF1的蛋白表達。此外，TCGA數(shù)據(jù)和IHC結果提示ATF1和MMP2 mRNA水平以及p-ATF1-T184和MMP2蛋白水平可作為胃癌的預后指標。兩個蛋白激酶相關基因LRBA和S100A8與ATF1在GC中的表達相關。

● 研究結論

p-ATF1-T184通過調節(jié)MMP2促進胃癌轉移。

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