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慢性腎臟?。–KD）是全球范圍內(nèi)嚴重的健康問題。CKD在男性和女性中的全球發(fā)病率分別為10.4%和11.8%，這使得該疾病成為腎病學(xué)家的重要挑戰(zhàn)。雖然CKD的病因多種多樣，但腎間質(zhì)纖維化（RIF）是終末期腎功能衰竭的共同病理途徑。

長非編碼RNA（lncRNA）是由超過200個核苷酸組成的非蛋白質(zhì)編碼RNA。它通過表觀遺傳修飾、轉(zhuǎn)錄調(diào)控和轉(zhuǎn)錄后修飾參與許多生理和病理過程。研究發(fā)現(xiàn)lncRNA與腎纖維化的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。lncRNA LINC 00968在糖尿病db/db小鼠組織和高糖誘導(dǎo)的系膜細胞中高表達，并發(fā)現(xiàn)其與肺腺癌的腫瘤進展和耐藥性有關(guān)。Livin和lncRNA-ATB參與TGF-β1誘導(dǎo)的腎小管細胞EMT。雖然lncRNA可以作為腎臟疾病臨床診斷的生物標志物，并且調(diào)控lncRNA的表達似乎是治療腎纖維化的一種有前景的方法，但關(guān)于lncRNA在RIF進展中的作用和潛在的分子機制知之甚少。

近日，名古屋大學(xué)醫(yī)學(xué)研究生院的研究人員在《分子治療核酸》雜志上發(fā)表了一篇題為《Long non-coding RNA lnc-CHAF 1B-3 promotes the renal interstitial fibrosis by regulating EMT-related genes in renal substitial tubular cells》的文章。本研究提示lncCHAF 1B-3通過調(diào)節(jié)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)換（EMT）相關(guān)信號來影響RIF的進程。因此，lncCHAF 1B-3是治療RIF的潛在靶標。

在這項研究中，研究人員研究了lncRNA在RIF中的功能?；蛐酒瑱z測結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）和低氧刺激均能顯著上調(diào)人腎小管上皮細胞lncRNA lnc-CHAF 1B-3（又稱Claudin 14反義RNA 1）的表達，并伴隨EMT相關(guān)基因表達的增加。

Inc-CHAF 1B-3表達的敲低顯著降低TGF-β1誘導(dǎo)的HK-2細胞中派-1、CDH 2、COL 1A 1、SNAI 1和SNAI 2表達的mRNA和蛋白水平。在RPTEC中也觀察到類似的結(jié)果，表明lnc-CHAF 1B-3在EMT過程和ECM產(chǎn)生或降解中起重要作用。相反，lnc-CHAF 1B-3的表達不受TNF-α的影響，TNF-α是一種促炎介質(zhì)，表明lnc-CHAF 1B-3不直接參與其下游信號傳導(dǎo)途徑。

伊加腎病患者腎組織薄切片qRT-PCR分析顯示，與輕度病例和MGA病例相比，晚期病例腎臟中l(wèi)nc-CHAF 1B-3的表達顯著增加。此外，lnc-CHAF 1B-3在腎臟中的表達水平與伊加腎病患者尿蛋白濃度及腎功能不全進展有關(guān)，提示lnc-CHAF 1B-3的表達對IgA腎病蛋白尿引起的腎功能不全具有重要意義。RNAscope FISH和片段特異性免疫熒光染色雙重染色顯示，lnc-CHAF 1B-3表達于近端小管的細胞質(zhì)中，無論疾病的嚴重程度如何。靶向近端小管是治療腎纖維化的有效策略;因此，lnc-CHAF 1B-3的近端小管的位置可以為藥物遞送提供優(yōu)勢。

綜上所述，本研究報道lnc-CHAF 1B-3在腎纖維化的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。Lnc-CHAF 1B-3可能成為治療腎纖維化的潛在靶點。然而，Lnc-CHAF 1B-3是否在表觀遺傳、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后或翻譯水平調(diào)節(jié)基因表達仍有待進一步研究。

蛋白組/代謝組實驗

? iTRAQ 定量蛋白質(zhì)組學(xué)

? Label Free 實驗檢測服務(wù)

? LC-MS/MS 蛋白質(zhì)譜鑒定

? DIA 全息掃描定量蛋白質(zhì)
? 廣泛靶向代謝組學(xué)

蛋白/核酸相互作用實驗

? GST pull down

? RNA pull down

? DNA pull down

? Co-IP 免疫共沉淀

? TAP-MS串聯(lián)親和純化

分子細胞生物學(xué)實驗

? 基因調(diào)取/合成 (cDNA克隆)

? 熒光定量PCR (qPCR)

? 載體構(gòu)建實驗服務(wù)

? miRNA靶基因驗證
? 慢病毒包裝

科研產(chǎn)品

? 哺乳動物細胞表達載體

? 人cDNA克隆庫

? 慢病毒表達載體

? 慢病毒干擾載體

抗體工程服務(wù)

? 單克隆抗體測序

? 抗體從頭測序

? 抗體表達服務(wù)

? 重組抗體表達

實驗試劑盒

? RNA pull down 試劑盒

? GST pull down 試劑盒

? COIP 試劑盒

? Flag 試劑盒