一抗和二抗有什么區(qū)別？

抗體（或免疫球蛋白）是糖蛋白免疫系統(tǒng)響應(yīng)“外來”物質(zhì)即抗原微生物上存在的每種抗體都是獨(dú)特的，并且對(duì)特定類型的抗原具有特異性，它會(huì)與其同源抗原結(jié)合并中和感染過程中微生物產(chǎn)生的毒素。抗體存在于血漿、血清、唾液和眼淚等體液中——事實(shí)上，它們約占血漿中蛋白質(zhì)的 20%。經(jīng)常產(chǎn)生抗體用于研究。它們根據(jù)其結(jié)合能力和用途分為初級(jí)和次級(jí)。

抗體結(jié)構(gòu)

一抗和二抗具有共同的結(jié)構(gòu)。抗體是 Y 形分子，具有 3 個(gè)大小大致相等的三個(gè)部分。它們由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈組成——二硫鍵將兩條重鏈連接在一起，每條重鏈連接到一條輕鏈。這些鏈的特定結(jié)構(gòu)和組合使抗體分子可以同時(shí)與多個(gè)細(xì)胞結(jié)合。抗體分子的不同部分可以結(jié)合多種抗原，也可以結(jié)合一些效應(yīng)分子。抗體的可變區(qū)或V區(qū)表示/指Y結(jié)構(gòu)的兩個(gè)臂，該區(qū)域可以與抗原結(jié)合。相比之下，Y 結(jié)構(gòu)的莖被稱為恒定區(qū)或 C 區(qū)，它只能與有限數(shù)量的效應(yīng)細(xì)胞和分子結(jié)合。

一抗和二抗

一抗

可以與特定蛋白質(zhì)或感興趣的生物分子結(jié)合的抗體稱為一抗。以大鼠、小鼠、山羊和兔等動(dòng)物為宿主，以單克隆抗體 (mAb) 或多克隆抗體 (pAb) 的形式生產(chǎn)一抗。 MAb 或 pAb 各有優(yōu)缺點(diǎn)，在選擇一抗之前需要考慮這些優(yōu)缺點(diǎn)。 MAb 由動(dòng)物的單個(gè) B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生，因此僅針對(duì)抗原的一個(gè)表位。 PAb 由動(dòng)物的多個(gè) B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生，并具有針對(duì)抗原的幾個(gè)表位的抗體的異質(zhì)混合物。 MAb 非常適合相同的生產(chǎn)和標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)，并且產(chǎn)生的背景染色最少或不產(chǎn)生背景染色。在使用 mAb 時(shí)，與不需要的蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性也降低了。

由于 pAb 可以結(jié)合單一抗原的多個(gè)表位，因此它們能夠識(shí)別抗原中的微小變化。它們還產(chǎn)生更強(qiáng)的抗原檢測(cè)信號(hào)。因此，它們非常適合涉及變性蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)。一抗以不同的粗制和純化形式開發(fā)和供應(yīng)。它們可用于檢測(cè)糖尿病、癌癥、阿爾茨海默病和帕金森病的生物標(biāo)志物。

二抗

二抗與直接附著于靶抗原的一抗結(jié)合。一抗的 V 區(qū)與抗原結(jié)合后，標(biāo)記的二抗將其 V 區(qū)連接到一抗的莖或 C 區(qū)。利用這種相互作用，二抗可以間接幫助檢測(cè)和純化目標(biāo)蛋白（抗原）。二抗在標(biāo)記和檢測(cè)方面更加靈敏和靈活——因此，它們?cè)诹魇郊?xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡和細(xì)胞成像等一系列應(yīng)用中用于一抗的比色、化學(xué)發(fā)光和熒光檢測(cè)。

二抗類型的選擇基于一抗的類別 - 免疫球蛋白 IgG 或 IgM、首選標(biāo)簽類型和來源宿主。由于大多數(shù)一抗是使用少數(shù)宿主物種開發(fā)的，并且大多數(shù)一抗屬于 IgG 類，因此制造商通常提供可用于許多不同檢測(cè)程序和系統(tǒng)的即用型二抗。常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗雞 IgG 或抗山羊 IgG。所選擇的二抗應(yīng)始終能夠識(shí)別產(chǎn)生一抗的宿主物種，例如，為了檢測(cè)從小鼠產(chǎn)生的一抗，使用抗小鼠二抗。特定檢測(cè)的最佳二抗也取決于標(biāo)簽類型。在 ELISA 和蛋白質(zhì)印跡中，標(biāo)記通常是化學(xué)發(fā)光、比色或基于熒光的，但在流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光中，僅使用熒光標(biāo)記。偶聯(lián)二抗將是所有這些測(cè)定的理想選擇。

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