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PCR引物可否用于測(cè)序?

只要符合條件,就可以使用PCR引物進(jìn)行測(cè)序。在 PCR 過(guò)程中,復(fù)制 DNA 片段,從而可以從一個(gè)小樣本中生成數(shù)百萬(wàn)個(gè) DNA 拷貝。該過(guò)程涉及使用引物,這些引物是通常長(zhǎng)約  15-30 個(gè)核苷酸的短 DNA 鏈。 每個(gè) PCR 反應(yīng)中使用兩個(gè)引物,它們被設(shè)計(jì)為位于感興趣的目標(biāo)區(qū)域(應(yīng)該復(fù)制的區(qū)域)的側(cè)翼。由于引物是定制設(shè)計(jì)的,它們可以由許多不同的核苷酸序列組成,研究人員可以從中選擇最適合他們需要的一種。  

 

確保在開(kāi)始測(cè)序前去除多余的 PCR 引物和未摻入的核苷酸。由于每次測(cè)序反應(yīng)使用一個(gè)引物,而PCR使用2個(gè)引物,如果在PCR中不去除這2個(gè)引物,您將得到兩個(gè)不可讀的相互疊加的序列。  

 

為了獲得高質(zhì)量的測(cè)序數(shù)據(jù),確保強(qiáng)大的  PCR 反應(yīng)非常重要。PCR 測(cè)序引物的 GC 含量應(yīng)在 40% 到 60% 之間。引物的GC含量(引物中G和C的數(shù)量占總堿基的百分比)應(yīng)為40-60%。借助領(lǐng)先的生物學(xué) PCR 平臺(tái),該平臺(tái)支持運(yùn)行 PCR  測(cè)試所需的幾乎所有試劑,測(cè)序變得更加高效和節(jié)省成本。


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