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中文標(biāo)題：富馬酸誘導(dǎo)的LncRNA-MIR4435-2HG能調(diào)節(jié)谷氨酰胺代謝重塑，促進(jìn)富馬酸水合酶缺陷型腎細(xì)胞癌的發(fā)展

發(fā)表期刊： Cell Death and Disease

中科院分區(qū)：1區(qū)

影響因子：9.2

發(fā)表時(shí)間：2024年2月

客戶單位：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院上海兒童醫(yī)學(xué)中心

使用產(chǎn)品：F2-RNA pull down試劑盒（輝駿生物自主研發(fā)產(chǎn)品，點(diǎn)擊查看）

● 研究背景
      富馬酸水合酶(FH)缺陷型腎細(xì)胞癌(RCC)是一種代謝紊亂引發(fā)的腫瘤，其發(fā)生的根本原因是FH基因的功能突變導(dǎo)致富馬酸水合酶無(wú)法正常編碼，進(jìn)而引起富馬酸在細(xì)胞微環(huán)境中積累。此外，富馬酸鹽也可以作為一種表觀遺傳調(diào)節(jié)劑。本研究探索了參與FH缺陷型RCC疾病過程的lncRNA及其作用機(jī)制。

● 內(nèi)容概述

2024年2月，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員在國(guó)際期刊Cell Death & Disease上發(fā)表題為“Fumarate induces LncRNA-MIR4435-2HG to regulate glutamine metabolism remodeling and promote the development of FHdeficient renal cell carcinoma”的最新論文，探討了FH缺陷型腎細(xì)胞癌(RCC)的代謝機(jī)制，發(fā)現(xiàn)LncRNA-MIR4435-2HG在FH缺陷型RCC中特異性高表達(dá)。LncRNA-MIR4435-2HG受到富馬酸鹽調(diào)控，其缺失可抑制谷氨酰胺代謝。從機(jī)制上看，LncRNA-MIR4435-2HG能特異性結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子STAT1，進(jìn)而轉(zhuǎn)錄激活GLS1，增強(qiáng)谷氨酰胺代謝，在FH缺陷型RCC發(fā)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用。GLS1抑制劑CB-839可顯著抑制該腫瘤生長(zhǎng)。

● 研究路線
1. 轉(zhuǎn)錄組和qPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：LncRNA-MIR4435-2HG在FH缺陷型RCC中特異性高表達(dá)；

2. 細(xì)胞和組織檢測(cè)表明：MIR4435-2HG的缺失顯著降低了FH缺陷型RCC腫瘤的生長(zhǎng)；

3. ChIP和表達(dá)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：富馬酸鹽通過H3K4me3修飾誘導(dǎo)MIR4435-2HG表達(dá)；
4. 代謝組學(xué)和表達(dá)實(shí)驗(yàn)表明：LncRNA-MIR4435-2HG通過增加谷氨酰胺代謝來(lái)促進(jìn)FH缺陷型RCC發(fā)展；
5. RNA pull-down MS和ChIP等互作實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：LncRNA-MIR4435-2HG特異性結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子STAT1，進(jìn)而轉(zhuǎn)錄激活谷氨酰胺酶1(GLS1)，促進(jìn)谷氨酰胺代謝重塑；
6. 體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)表明GLS1抑制劑CB-839可顯著抑制FH缺陷型RCC的增殖。

● 結(jié)論
本研究通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)了LncRNA-MIR4435-2HG在細(xì)胞和組織中高表達(dá)，之后利用代謝組學(xué)和RNA pull down等方法分析了MIR4435-2HG在臨床樣本、細(xì)胞和動(dòng)物模型中調(diào)控FH缺陷RCC代謝重塑的分子機(jī)制，確定了LncRNA-MIR4435-2HG可以作為藥物敏感性標(biāo)記物，并找到了該疾病的潛在治療靶點(diǎn)GLS1。

F2-RNA pull down試劑盒簡(jiǎn)介

輝駿生物自主研發(fā)的 F2-RNA pull-down 試劑盒（專利號(hào)：ZL202111160837.9），利用一段只有16nt的RNA標(biāo)簽“F2”與目標(biāo)RNA連接，通過固定在磁珠上的特異性配體與F2標(biāo)簽的強(qiáng)親和力，高效調(diào)取目標(biāo)RNA，同時(shí)捕獲與之結(jié)合的蛋白；之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)特定蛋白，也可以采用質(zhì)譜（LC-MS/MS）技術(shù)鑒定未知蛋白。

輝駿生物FII-RNA pull down試劑盒和方法及其應(yīng)用專利證書

F2-RNA pull down試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1、F2標(biāo)簽是一段RNA序列，可以連接和標(biāo)記各種類型的RNA；

2、F2標(biāo)簽很短，只有16nt，幾乎不影響目標(biāo)RNA的結(jié)構(gòu)或功能；

3、可以用于體內(nèi)或體外標(biāo)記目標(biāo)RNA；

4、F2標(biāo)簽與其特異性配體具有很強(qiáng)親和力，能夠高效調(diào)取F2-RNA及其結(jié)合蛋白。